Čo je obezita?
Ide o zdravotný stav, ktorý vzniká, keď má človek ďalšiu váhu vo forme uloženého tuku, čo môže ovplyvniť celkové zdravie. Obezitu možno nazvať komplexnou chorobou, pretože sa môže skomplikovať do rôznych problémov, ako sú niektoré druhy rakoviny, vysoký krvný tlak, cukrovka a srdcové choroby. Ide teda o viac než len kozmetický faktor.
Pre mnohých ľudí je veľmi ťažké vyhnúť sa obezite a je to spôsobené dedičným faktorom v kombinácii so zlou stravou a neaktívnym životným štýlom. U iných subjektov s obezitou, bez akéhokoľvek dedičného dôvodu, zmeny správania môžu pomôcť schudnúť zvýšená fyzická aktivita, zmeny stravovania a niektoré lieky. Režim chudnutia spolu s liekmi na predpis sú zvyčajne určené pre ľudí s chronickou obezitou.
Ako sa zisťuje obezita?
Normálne sa nástroj BMI používa na posúdenie hmotnosti osoby podľa pohlavia, veku, hmotnosti a výšky. Index BMI nad 25 znamená, že osoba má nadváhu, zatiaľ čo hodnota nad 30 znamená, že osoba je obézna.
Telesný tvar a hmotnosť človeka sa ďalej určuje podľa rozloženia tuku, pomeru pásu k výške a pomeru pásu k bokom. U obézneho človeka sa môže vyvinúť aj artritída a metabolický syndróm. Metabolický syndróm zahŕňa rôzne problémy, ako je cukrovka typu II a vysoký krvný tlak.
Aké faktory vedú k obezite? K obezite u mužov a žien môže viesť niekoľko faktorov, ktoré sú uvedené nižšie:
– Konzumácia dodatočných kalórií na dlhú dobu
– Vedenie neaktívneho životného štýlu
– Nedostatočný spánok
– Prítomnosť endokrinných disruptorov
– Prírastok hmotnosti v dôsledku akýchkoľvek určitých liekov
– Gén obezity
Obézny človek sa musí pred cvičením alebo užívaním akéhokoľvek druhu lieku poradiť s lekárom a prejsť správnym vyšetrením tela.
Ako sa lieči obezita?
Profesionálny lekár po fyzickom vyšetrení vykoná niekoľko testov. Je dôležité vziať do úvahy zdravotnú anamnézu obéznej osoby a následne stanoviť vhodnú diagnózu. To nakoniec značne uľahčí a zefektívni proces liečby z dlhodobého hľadiska.
Mnohí lekári odporúčajú obéznym ľuďom silné lieky, ktoré pomáhajú pri chudnutí, ale poškodzujú iné orgány ako obličky a pečeň. Tieto lieky pôsobia neprirodzene, aby pomohli človeku zbaviť sa prebytočného tuku. Čo musí obézny človek urobiť, je; začnite denne cvičiť a dbajte na zdravú výživu a potom si vyberte prírodný liek, ktorý vám pomôže zbaviť sa nahromadeného tuku.
Včelí jed obsahuje rôzne základné zložky, ktoré sú užitočné pri rôznych zdravotných problémoch. Bolo pozorované, že včelí jed so správnym dávkovacím režimom môže pomôcť zbaviť sa obezity. A najlepšie na tom je, že pri starostlivom podávaní nedochádza k žiadnym vedľajším účinkom tejto liečby.
Včelí jed potláča diferenciáciu preadipocytov a obezitu vyvolanú diétou s vysokým obsahom tukov inhibíciou adipogenézy
Úvod
Obezita vzniká v dôsledku nadmerného alebo abnormálneho hromadenia tuku. Hypertrofia a hyperplázia adipocytov sú určujúcimi faktormi tohto zdravotného stavu. Adipocyty sa diferencujú od iných prekurzorových buniek alebo kmeňových buniek a to je komplexný mechanizmus génovej expresie, ktorý vedie k rôznym ochoreniam súvisiacim s obezitou. 3T3-L1 preadipocyt, nediferencovaný fibroblast, bol použitý v rôznych klinických štúdiách; súvisí s diferenciáciou a adipogenézou. Tieto bunky majú inú polohu ako adipogénne induktory, ktoré zahŕňajú dexametazón, IBMX (3-izobutyl-1-metylxantín) a inzulín.
Diferenciačná sekvencia od preadipocytov k adipocytom pozostáva z terminálnej diferenciácie, mitotickej klonálnej expanzie a konfluencie. Čo sa stane v prvej fáze je to, že konfluentné bunky sa stanú súčasťou fázy zastavenia rastu. Neskôr tieto bunky reštartujú svoj cyklus a zvýšia počet buniek 3 až 4-krát počas fázy MCE. Hyperplázia pozorovaná počas tejto fázy bunkovej diferenciácie je spojená s produkciou adipogénnych transkripčných faktorov.
Je potrebné poznamenať, že CCAAT/ (C/EBPs) a PPAR (receptory aktivované peroxizómovým proliferátorom) y podporujú fázu diferenciácie adipocytov. V ranom štádiu sa diferenciácia buniek 3T3-L1, expresia C/EBPδ a C/EBPβ významne zvýšila po hormonálnej indukcii, ktorá v konečnom dôsledku zvyšuje expresiu PPARγ a C/EBPα. C/EBPδ je veľmi dôležité, aby MCE vznikol počas diferenciačnej fázy v ranom štádiu adipogenézy. Génová expresia C/EBPβ presviedča expresiu C/EBPα a PPARγ. Úplná aktivácia rodiny PPARy a C/EBP reguluje expresiu rôznych adipogénnych faktorov, ktoré podporujú akumuláciu tuku.
AMPK (adenozínmonofosfátom aktivovaná proteínkináza), je tiež známa ako hlavný kontrolór energetickej homeostázy, slúži ako dôležitý cieľ pri zvládaní obezity. Počas adipogenézy aktivácia AMPK reguluje metabolizmus lipidov a glukózy prostredníctvom inaktivácie metabolických enzýmov. Fosforylácia AMPK inaktivuje ACC (acetyl koenzým, čo je karboxyláza) a HMGCR (3-hydroxy-3-metylglutaryl koenzým, čo je reduktáza), čo vedie k prevencii syntézy cholesterolu a mastných kyselín a zvýšenej oxidácii mastných kyselín. Zistilo sa tiež, že AMPK riadi smerovanie acyl-CoA smerom k biosyntéze lipidov a beta-oxidácii, čo vedie k inhibícii GPAT (glycerol-3-fosfát acyltransferázy). Okrem toho fosforylácia AMPK tiež zabraňuje expresii adipogénnych transkripčných faktorov, ako sú PPARy, C/EBPα, C/EBPδ a C/EBPβ.
BV (včelí jed) je komplex rôznych peptidov, proteínov a iných zložiek s nízkou hmotnosťou, ktoré pôsobia ako účinný obranný nástroj. Napriek bolestivému bodnutiu včelou medonosnou sa jej jed v rôznych formách už dlho používa na liečbu bolesti, chorôb a dokonca aj nádorov. Zistilo sa, že inhibíciu aterosklerotických lézií prostredníctvom potlačenia neškodlivej hyperplázie prostaty a protizápalového mechanizmu u klinických potkanov predstavuje včelí jed.
Melittín je možno najužitočnejšou zložkou včelieho jedu, ktorý je zodpovedný za downreguláciu prozápalových cytokínov, signálnej dráhy NF-KB, proaterogénnych proteínov a adhéznych molekúl a za zlepšenie aterosklerotickej lézie na experimentálnych zvieracích modeloch ošetrených vysokým obsahom tuku. Pridaním ďalších bola pozorovaná infiltrácia makrofágmi, fibrotické faktory, adhézne molekuly, prozápalové cytokíny a lipidy zoslabené apamínom u experimentálnych aterosklerotických myší vyvolaných tukom. Uvádza sa, že včelí jed vykazuje účinky proti obezite. Mechanizmus, ktorý za tým stojí, je potrebné dôkladne preštudovať. V tomto klinickom experimente sa pozorne skúmali účinky včelieho jedu proti obezite v preadipocytoch 3T3-L1 v modeloch obezity vyvolanej HFD.
Metóda
Olejová červeň O, inzulín, DEX, IBMX a BVA a ďalšie chemikálie boli získané od Sigma Chemical, USA. Penicilín-streptomycín, fetálne hovädzie sérum, hovädzie sérum a Dulbeccovo modifikované eagles médium boli všetky získané od Life Technologies, USA. Zatiaľ čo protilátky proti β-aktínu (C4; kat. č. sc-47778), C/EBPα (C-18; kat. č. sc-9314) a PPARy (E-8; kat. č. sc-7273) boli získané od Santa Cruz Biotechnology, Inc, USA. ERK, JNK, fosforovým stresom aktivovaná proteínkináza/Jun-aminoterminálna kináza, fosfo extracelulárnym signálom regulovaná kináza, fosfo-p38 MAPK, p38, AMPK, p-AMPK, ACC a p-ACC protilátky boli získané od Cell Signaling Technology, USA, zatiaľ čo protilátky konjugované s chrenovou peroxidázou boli získané z Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc. USA. SYBR Green Master Mix bol získaný od Applied Biosystems, USA. PPARy, C/EBPô, C/EBPa, C/EBPp a GAPDH boli získané od Bioneer, Kórea.
3T3-L1, Preadipocyty boli získané z Korean Cell Line Band, Kórea a potom kultivované v DMEM s doplnkom 10 % BS, 100 ug/ml streptomycínu a 100 U/ml penicilínu v inkubátore s teplotou 37 stupňov Celzia a 5 % oxidu uhličitého. Diferenciácia adipocytov sa uskutočňovala kultiváciou buniek 3T3-L1 v miskách pri hustote 2 x 105 buniek/ml do konfluencie. Počas štádia úplného sútoku boli platne ošetrené rôznymi koncentráciami včelieho jedu. Počas druhého štádia, ktoré začalo 3. deň diferenciácie, boli bunky vystavené 1 u/ml inzulínu v DMEM s 10 % FBS (v/v) a 1 % PS. Počas tretieho alebo posledného štádia sa bunky presunuli do DMEM s 1 % PS a 10 % FBS – kultivačné médium sa vymenilo po 3 dňoch.
Životaschopnosť buniek sa hodnotila pomocou testu MTT (3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid). Bunky 3T3-L1 sa umiestnili do 96-jamkovej platne a ošetrili sa rôznymi koncentráciami včelieho jedu počas 72 hodín pri teplote 37 stupňov Celzia s určitou vlhkosťou a 5 % oxidu uhličitého. Po dokončení spracovania sa bunky podrobili farbeniu roztokom MTT počas 4 hodín pri teplote 37 stupňov Celzia. Po odstránení nadbytku činidla sa nerozpustný formazan rozpustil v DMSO. Životaschopnosť buniek sa vypočítala pri 570 nm pomocou mikroobjemového spektrofotometra Epoch.
Celková RNA bola podrobená izolácii a bunky boli homogenizované s činidlom Trizol získaným od Invitrogen, USA. cDNA sa získala izoláciou celkovej RNA, priméru d16 a AMV-RT. Relatívna génová expresia sa vypočítala pomocou PCR v reálnom čase s použitím hlavnej zmesi SYBR green PCR. Hodnoty Ct génu C/EBPô, PPARy, C/EBPa a C/EBPp sa normalizovali pomocou programu Gene Express Program.
Získané vzorky krvi sa centrifugovali pri 1003 x g počas 15 minút pri normálnej teplote, aby sa vytvorili vzorky séra. Neskôr boli uskladnené pri -80 stupňoch Celzia na vykonanie ďalších meraní. Sérové koncentrácie LDL cholesterolu a triglyceridov boli stanovené pomocou enzymatických metód uskutočnených s komerčnými súpravami od BioVision, USA. Ďalšie zahrnuté procesy boli: MTT test, farbenie Oil Red O, analýza western blot, histologická analýza a štatistická analýza.
Výsledky
Je známe, že akumulácia lipidov a hyperplázie sa vyskytuje v bunkovej línii 3T3-L1 počas procesu diferenciácie. Tieto bunkové línie boli ošetrené včelím jedom s koncentráciou začínajúcou od 1,25 ug/ml až do 40 ug/ml v MDO alebo BS. Po ošetrení bunkových línií včelím jedom sa životaschopnosť buniek hodnotila testom MTT (3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid). Zistilo sa, že včelí jed nemá žiadny vplyv na životaschopnosť buniek v kultivačnom médiu, ale včelí jed znižuje životaschopnosť buniek pri koncentráciách 2,5 ug/ml a vyšších.
Stanovil sa inhibičný účinok včelieho jedu na akumuláciu lipidov v adipocytoch liečených včelím jedom a bez neho počas 9 dní. Zistilo sa, že adipocyty indukované diferenciáciou dramaticky zvýšili ukladanie lipidov takmer dvojnásobne v porovnaní s nediferencovanými bunkami. Na druhej strane liečba včelím jedom pôsobivo znížila akumuláciu lipidových kvapiek, ale v systéme závislom od dávky.
Transkripčné faktory ako rodina C/EBP a PPARy hrajú dôležitú úlohu pri diferenciácii a dozrievaní adipocytov. Antiadipogenézny účinok včelieho jedu v diferencovaných adipocytoch sa skúmal pomocou analýzy Western blot a qRT-PCR. Zistilo sa, že expresia mRNA PPARy, C/EBPδ, C/EBPα a C/EBPβ bola zvýšená počas diferenciáciou indukovaných adipocytov v porovnaní s tým, čo bolo pozorované v nediferencovaných bunkách. Liečba včelím jedom pomohla znížiť expresiu mRNA rodiny C/EBP a tiež znížila expresiu PPARy pre hladiny proteínu aj mRNA.
Na preskúmanie účinku včelieho jedu na dráhu MAPK sa pomocou analýzy Western blot stanovila proteínová expresia rôznych faktorov zapojených do dráhy MAPK. Tento proces sa uskutočnil v diferencovaných adipocytoch. Zistilo sa, že fosforylácia JNK a ERK sa znížila, zatiaľ čo fosforylácia p38 stúpala počas diferenciácie v porovnaní s výsledkami nediferencovaných kontrolných buniek. Fosforylácia JNK a ERK bola významne zvýšená v adipocytoch ošetrených včelím jedom, zatiaľ čo fosforylácia p38 bola výrazne znížená.
Táto klinická štúdia tiež odhalila, že celková telesná hmotnosť myší patriacich do skupiny HFD (diéta s vysokým obsahom tuku) sa zvýšila v porovnaní s telesnou hmotnosťou skupiny ND (normálna strava). Úplne na rozdiel od skupiny HFD injekcia včelieho jedu znížila celkovú telesnú hmotnosť, prírastok hmotnosti a tuk. Obezita je vo všeobecnosti charakterizovaná hyperpláziou a hypertrofiou tukového tkaniva a z tohto dôvodu sa skúmali inhibičné účinky včelieho jedu pomocou farbenia H a E. Údaje analýzy farbenia H a E ukázali, že skupina myší s HFD indikovala hypertrofiu adipocytov v tukovom tkanive nadsemenníkov, zatiaľ čo skupina liečená včelím jedom preukázala potlačenú hypertrofiu adipocytov.
Záver
Na záver môžeme vyhlásiť, že táto klinická štúdia úspešne preukázala, že včelí jed bráni skorému adipogénnemu procesu downreguláciou štádia MCE prostredníctvom regulácie signalizácie PPARγ, AMPK, ERK a C/EBPs. Podľa týchto zistení možno tiež povedať, že včelí jed možno použiť ako účinný liečebný a preventívny prostriedok pri liečbe obezity.
Zdroj: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5793096/